Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Метод лабораторной диагностики, основанный на взаимодействии "антиген-антитело" называется иммуноферментным анализом (ИФА). Это позволяет выявлять белковые вещества, такие как ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей. В настоящее время современная диагностика невозможна без ИФА и других высокочувствительных лабораторных анализов.

В прежние времена врачи вынуждены были опираться на косвенные признаки болезни и проводить длительные микроскопические исследования в целях определения возбудителя инфекции. Сегодня всего один тест, такой как иммуноферментный анализ, может подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз, что значительно облегчает процесс диагностики.

Для того чтобы понять, как работает иммуноферментный анализ, нужно разобраться в процессе реакции "антиген - антитело". Антигены - это вещества, которые чужды организму и, как правило, имеют белковую природу. Они могут попадать в наш организм вместе с инфекционными агентами или же частичками другой крови, если она отличается по группе крови от нашей. Когда такие антигены попадают в наш организм, он начинает производить особые вещества - антитела, которые называются иммуноглобулинами.

Антитела похожи на ключи, которые подходят только к определенным антигенам. Когда антитела связываются с антигенами, образуется иммунный комплекс. Этот процесс называется реакцией "антиген - антитело". Иммунные комплексы легче распознаются клетками иммунитета и уничтожаются.

Итак, иммуноферментный анализ основан на принципе реакции "антиген - антитело". Он позволяет определить наличие или отсутствие определенных антигенов в крови или других биологических жидкостях. Этот метод широко используется в диагностике различных заболеваний, а также в научных исследованиях.

Показатели, которые нужно проанализировать

Один из классов иммуноглобулинов, IgM, может указывать на наличие острого инфекционного процесса в организме. Если IgM отсутствует, то это может быть связано либо с отсутствием конкретного возбудителя в организме, либо с тем, что инфекция перешла в хроническую стадию.

Если тест на IgM даёт отрицательный результат, но есть IgA, то это часто свидетельствует о реинфекции, хронической или скрыто протекающей инфекции.

Положительные результаты обнаружения как IgA, так и IgM говорят о том, что острая фаза заболевания находится в самом разгаре.

Наличие IgG может указывать на то, что заболевание перешло в хроническую стадию, либо на то, что организм начал вырабатывать иммунитет к инфекционному агенту после выздоровления.

Возможные результаты ИФА

Отчетливые данные, отображаемые в виде таблицы, являются частой формой представления результатов анализа ИФА. Эти данные могут включать в себя перечисление всех антител или антигенов, с указанием результатов теста, отрицательных или положительных. Они также могут содержать количественный показатель, который указывает на количество антител в образце. Такой показатель может быть отрицательным, слабоположительным, положительным или резко положительным.

Еще один количественный показатель - индекс авидности антител, выраженный в процентах. Если индекс выше, это указывает на то, что инфекционный процесс длится дольше.

ИФА – это один из тех анализов, которые помогают, при самых разных патологиях, обнаружить специфические антитела и антигены. Существует тысячи различных видов тест-систем ИФА, поэтому этот метод используется в большинстве медицинских отделений. Результаты ИФА позволяют определить правильный диагноз и назначить оптимальную терапию, что обеспечивает эффективное лечение заболевания.

Классификация видов антител

Антитела имеют несколько различных разновидностей, каждая из которых выполняет свою функцию на разных стадиях иммунного ответа. Первыми антителами, которые синтезируются в ответ на проникновение антигена в организм, являются иммуноглобулины класса M (IgM). Эти антитела достигают наибольшей концентрации в первые дни инфекционного процесса.

За ними следуют иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до окончательной победы над инфекцией. Кроме того, IgG продолжает циркулировать в организме, обеспечивая иммунитет к повторному инфицированию. Благодаря вакцинации, которая включает в себя ослабленные антигены микробов и вирусов, в крови появляются большие количества IgG. При контакте с реальной угрозой эти антитела быстро подавляют инфекцию до того, как она сможет навредить здоровью.

Кроме IgM и IgG, существуют и другие виды антител, такие как иммуноглобулины класса A (IgA), которые содержатся в больших количествах в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму, и иммуноглобулины класса E (IgE), которые борются с паразитарными инфекциями. В лабораторной диагностике чаще всего используются IgM, IgG и IgA: по уровню концентрации этих антител можно определить, на какой стадии инфекционного процесса находится организм, а также узнать, было ли у человека когда-либо то или иное заболевание (например, краснуха или ветряная оспа).

Зачем нужен иммуноферментный анализ?

Если врач подозревает, что за заболевание отвечает конкретная инфекция или планирует проверить уровень определенного гормона, то ему необходимо назначить пациенту иммуноферментный анализ. Это исследование помогает выявить наличие антигенов и антител в организме человека.

В лабораторных условиях иммунная реакция «антиген - антитело» может быть воссоздана путем использования уже готовых антигенов или антител для определения наличия в соответствующем образце связующих соединений.

Для начала, в лаборатории необходимо получить образец биологической жидкости — обычно это сыворотка крови. Затем используются пластиковые планшеты с лунками, которые содержат очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела в случае, если ищут антиген). Образцы помещаются в лунки, где происходит процесс образования иммунных комплексов. Если связующее соединение образуется, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию, и результаты анализа оцениваются по оптической плотности при помощи инструментального метода.

ИФА имеет две формы — качественный и количественный. В первом случае можно получить однозначный ответ: найдено искомое вещество в образце, или нет. В случае количественного анализа, более сложная цепь реакций позволяет оценить концентрацию антител в крови пациента, что сравнивается с результатами предыдущих тестов и может помочь выявить стадию инфекционного процесса.

Интересная информация

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором были использованы меченые антитела и антигены для индикации успешной реакции. Однако, проведение такого анализа представляло потенциальный риск для здоровья сотрудников лаборатории, поэтому ученые начали искать безопасную альтернативу. Именно так в 1971 году был изобретен иммуноферментный анализ (ИФА).

Какие преимущества у метода ИФА?

Метод ИФА (иммуноферментный анализ) – это эффективный и чувствительный метод диагностики многих заболеваний, который позволяет точно идентифицировать антитела или антигены в крови. Он имеет множество преимуществ перед другими методами диагностики.

Высокая чувствительность. Одним из основных преимуществ метода ИФА является его высокая чувствительность. Это значит, что метод позволяет распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока.

Высокая специфичность. Ещё одним преимуществом ИФА является его высокая специфичность. Это означает, что метод позволяет производить диагностику без ошибок. Если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не какие-то другие.

Возможность определить заболевание на ранней стадии. Одним из главных преимуществ метода ИФА является возможность определить заболевание на ранней стадии. Метод ИФА во многом заменил золотой стандарт микробиологии – бактериологический метод диагностики. Благодаря ИФА, для идентификации возбудителя достаточно обнаружить IgM-антитела в крови. Это значительно повышает точность диагностики и позволяет начать лечение на ранних этапах болезни.

Низкая вероятность ошибки. В методе ИФА снижается вероятность ошибки благодаря высокой степени технологичности проведения анализа, минимизирующей влияние человеческого фактора. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Метод ИФА, несмотря на его точность, имеет некоторые недостатки. Для его проведения необходимо знать, что именно искать - врач должен иметь представление о характере заболевания. Поэтому случайный тест в надежде на угадывание диагноза не имеет смысла.

Кроме того, при диагностировании инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может обнаружить возбудителя и определить его конкретные свойства. Он только указывает на наличие антител в крови у пациента, что косвенно свидетельствует о наличии чужеродного микроорганизма в организме.

Стоит отметить, что ИФА является достаточно точным, но не самым дешевым методом диагностики. Поэтому использование метода должно быть обоснованным, а интерпретацией результатов должен заниматься опытный врач.

Назначение и обнаружение заболеваний с помощью ИФА анализа имеет множество показаний, особенно для диагностики инфекционных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и определения уровня гормонов в крови. Некоторые из многочисленных целей анализа включают:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
• IgM и IgG к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
• IgG к ВИЧ;
• IgM и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
• IgM и IgG к вирусу Эпштейна — Барр;
• IgM и IgG к герпетическим инфекциям;
• IgM и IgG к токсоплазмозу;
• IgM и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
• IgG к паразитарным заболеваниям;
• IgM и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
• IgG к хеликобактерной инфекции.
• Оценка присутствия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Обнаружение онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, таких как прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие.

Один из основных биоматериалов, используемых для ИФА (иммуноферментного анализа) - сыворотка крови. Из образца крови, взятого из вены пациента, в лаборатории удаляются форменные элементы, которые могут затруднять проведение анализа. В случае диагностики других заболеваний, таких как инфекции, анализ проводится с использованием спинномозговой жидкости, околоплодных вод, мазков слизистых оболочек и т.д.

Для получения точных результатов рекомендуется сдавать кровь натощак. Если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний, за две недели до тестирования следует отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов. Такие меры помогают избежать возможных искажений в результатах анализа.

Статья о сроках готовности результатов ИФА

Чтобы получить результаты анализа ИФА, потребуется немного времени и организации со стороны лаборатории. Однако, при наличии всех необходимых реактивов и хорошей организации, результаты анализа можно будет получить уже через один или два дня после взятия крови от пациента.

В некоторых экстренных случаях, когда необходим результат анализа ИФА как можно быстрее, вы можете получить его в течение двух или трех часов. Однако, чтобы это произошло, требуется от лаборатории дополнительная тщательность и внимание к каждой детали.

Пояснительной информацией по иммуноферментному анализу (ИФА) является, что его качественный результат сохранит однозначный ответ, который сообщит, найдено ли искомое вещество в образце или же нет. Если речь идет о количественном анализе на основе ИФА, то концентрацию можно выразить численным значением или в виде соответствующего количества знаков "+" (которых может быть от одного до нескольких).

Фото: freepik.com